(Като доверен доставчик, HANGZHOU JECI BIOCHEM предлага стабилно-производство, високо-качествен NAD (никотинамид аденин динуклеотид, CAS 53‑84‑9), осигурявайки надеждна поддръжка на суровини за IVD и приложения за метаболитен анализ. Нашата постоянна продукция и строг контрол на качеството ни правят предпочитан партньор за доставка на NAD-клас за диагностика.)
NAD (никотинамид аденин динуклеотид) е важен коензим, естествено присъстващ в клетките, съществуващ в две форми: окислена форма (NAD⁺) и редуцирана форма (NADH). Той може да се преобразува чрез редокс реакции, регулирайки различни биологични процеси като клетъчен енергиен метаболизъм и сигнална трансдукция. NAD участва в ключови ензимни реакции за улавяне на метаболитните промени, а аномалиите в нивата на NAD и NADH и техните съотношения са тясно свързани с появата и развитието на много заболявания. Следователно той се е превърнал във важен маркер за клинично биохимично изследване и ранен скрининг на заболяването. NAD продукти с висока-чистота и висока{5}}стабилност диагностичен-клас, като основни суровини за in vitro диагностични реагенти (IVD) и комплекти за метаболитно тестване, играят ключова роля за подобряване на чувствителността на откриване и надеждността на резултатите.
История на развитието на диагностичен-клас NAD
През 1906 г. Артър Хардън открива "мистериозен коензимен фактор", който насърчава метаболизма по време на неговото изследване на алкохолната ферментация на дрождите (по-късно доказано, че е NAD).
През 1929 г. Ханс фон Ойлер-Челпин идентифицира динуклеотидната структура на NAD.
През 1930 г. Ото Варбург изяснява редокс механизма между NAD и NADH, изяснявайки, че NADH проявява характерна ултравиолетова абсорбция при 340 nm, докато NAD няма абсорбция при тази дължина на вълната, поставяйки теоретичната основа за ензимни анализи.
През 1948 г. Horecker et al. потвърди моларния коефициент на екстинкция на NADH при 340 nm, което позволява директно количествено определяне на скоростта на ензимната реакция чрез промени в абсорбцията [1].
През 1961 г. Оливър Х. Лоури създава цикличния метод NAD(P)/H, пионер в количествения анализ на тъканно/клетъчно NAD(P)/H.
От 1962 до 1963 г. Boehringer Mannheim (по-късно придобит от Roche) пусна комплект реагенти, базиран на NADH 340 nm абсорбционно откриване за лактат дехидрогеназа (LDH), постигайки първото търговско приложение на NAD с диагностичен-клас като коензимен суров материал.
През 1973 г. Bernofsky et al. установява принципа на ADH-PES-MTT система за усилване (ADH-PES-MTT колориметрична система) [2];同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) разработи ADH-MDH двоен{9}}ензимен цикличен метод, позволяващ високочувствително откриване на NAD/NADH [3].
Оттогава диагностичният -клас NAD се превърна в основна суровина за рутинни биохимични тестове и непрекъснато се разширява в авангардни-области като изследване на биомаркери за невродегенеративни заболявания, проследяване на туморния метаболизъм и оценка на стареенето.
Диагностични - клас NAD сценарии за приложение
Основни суровини за клинична биохимична диагностика
① Откриване на лактат дехидрогеназа (LDH).
Принцип на откриване:
Лактат+NAD+⟶LDHПируват+NADH+H+
Сценарии за приложение: Катедра по кардиология (диагностика на остър инфаркт на миокарда), клинична лаборатория (диагностика на хемолитична анемия), хепатология (оценка на увреждане на чернодробните клетки) и др.
Нормален диапазон на LDH: 140 - 280 U/L (възрастни, съществуват разлики между методите)
Клинично значение: > 280 U/L (показва тъканно увреждане (черен дроб, сърце, бъбрек, мускул, бял дроб и т.н.)), > 500 U/L (често се наблюдава при инфаркт на миокарда, хемолитична анемия, злокачествени тумори, тежки инфекции).
② Откриване на малат дехидрогеназа (MDH).
Принцип на откриване:
Ябълчена киселина+NAD+⟶MDHОксалооцетна киселина+NADH+H+
Сценарии за приложение: Клинични реактиви (диагностика на митохондриална болест), Научно изследователско поле (изследване на функцията на митохондриите) и др.
Нормален диапазон на MDH: 12.5 - 50 U/L (различните лаборатории имат малки разлики поради методите за откриване и реагентите)
Клинично значение: Елевацията показва митохондриално увреждане, тъканна некроза и др.
③ Откриване на изоцитрат дехидрогеназа (ICDH).
Принцип на откриване:
Изолимонена киселина+NAD+⟶ICDH -Кетоглутарова киселина+NADH+H+
Сценарии за приложение: Клинична диагностика на митохондриални заболявания, Научно изследователско поле (оценка на увреждане на черния дроб, изследване на енергийния метаболизъм) и др.
Нормален диапазон на ICDH: 1 - 5 U/L (серум)
Клинично значение: Елевацията показва увреждане на митохондриите, увреждане на хепатоцитите, тъканна некроза и др.
④Откриване на креатин киназа (CK).
Принцип на откриване:
Фосфокреатин+ADPGлюкоза+ATPG-6-P+NAD+⟶CKКреатин+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Сценарии на приложение: Отделение по кардиология (остър миокарден инфаркт, миокардит), отделение по ортопедия/спешна помощ (мускулно нараняване, рабдомиолиза), неврология (миопатия) и др.
Нормален диапазон на CK: мъже 38 - 174 U/L; Жени 26 - 140 U/L (разлики между методите)
Клинично значение: Повишените нива показват увреждане на миокарда или скелетната мускулатура, често наблюдавано при миокарден инфаркт, миокардит, рабдомиолиза, усилено физическо натоварване и др.
⑤Откриване на глюкоза
Принцип на откриване:
Глюкоза+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Сценарии на приложение: Ендокринология (диагностика на диабет и мониториране на кръвната захар), Спешно отделение (хипогликемична кома, спешна диагностика на хипергликемия), реанимация (мониторинг на кръвната захар на пациенти в интензивно отделение) и др.
Нормален диапазон на глюкозата: на гладно 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 часа след хранене < 7,8 mmol/L
Клинично значение: Повишени нива се наблюдават при диабет, стресова хипергликемия; Понижени нива се наблюдават при хипогликемия, инсулинома, тежко чернодробно заболяване и др.
⑥Откриване на лактат
Принцип на откриване:
Лактат+NAD+⟶LDHПируват+NADH+H+
Сценарии за приложение: Спешно отделение (оценка на шок/тъканна хипоксия), интензивно отделение (след - преценка за спасяване на критични пациенти), отделение по кардиология (сърдечна недостатъчност), инфекциозни болести (сепсис), спортна медицина (оценка на физическия капацитет на спортисти) и др.
Нормален диапазон на лактат: 0.5 - 2.2 mmol/L (венозна кръв)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Откриване на галактоза
Принцип на откриване:
-D-галактоза+NAD+⟶GalDHгалактонова киселина+NADH+H+
Сценарии за приложение: неонатален скрининг (диагностика на галактоземия), педиатрия (вродени грешки на метаболизма), гастроентерология (идентификация на непоносимост към лактоза), хепатология (оценка на чернодробната функция) и др.
Нормален диапазон на галактозата: Серум на гладно: < 0,28 mmol/L; Новородени: < 1,11 mmol/L
Клинично значение: Повишени нива се наблюдават при галактоземия, чернодробна недостатъчност, вроден дефицит на галактозен метаболитен ензим и др.
⑧ Откриване на етанол
Принцип на откриване:
Етанол+NAD+⟶ADHАцеталдехид+NADH+H+
Сценарии за приложение: Спешно отделение (Диагностика на остро алкохолно отравяне), Център за физически прегледи (Тест за алкохол на водача), Криминалистична идентификация (Измерване на концентрацията на алкохол в кръвта) и др.
Нормален диапазон на етанол: 0 mmol/L (не-пиещи)
Клинично значение: Повишените нива показват консумация на алкохол или алкохолно отравяне; прекалено високите концентрации могат да доведат до депресия на централната нервна система, инхибиране на дишането и кръвообращението.
⑨ -Откриване на хидроксибутират
Принцип на откриване:
-Хидроксимаслена киселина+NAD+⟶ -HBDHАцетооцетна киселина+NADH+H+
Сценарии за приложение: Ендокринология (диагностика на диабетна кетоацидоза), хранене (мониторинг на хранителния прием) и др.
Нормален диапазон на -хидроксибутират: Кръв на гладно: < 0,27 mmol/L (Разлики между методите)
Клинично значение: Повишените нива показват диабетна кетоацидоза, гладуване, продължително -гладуване, алкохолна кетоацидоза и др.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Откриване на хидроксимаслена киселина
Принцип на откриване:
-Хидроксимаслена киселина+NAD+⟶ -HBDHАцетооцетна киселина+NADH+H+
Сценарии за приложение: Ендокринология (диагностика на диабетна кетоацидоза), хранене (проследяване на диета) и др.
Нормални граници на -хидроксибутирова киселина: Кръв на гладно: < 0,27 mmol/L (Разлики между методите)
Клинично значение: Повишените нива показват диабетна кетоацидоза, гладуване, продължително -гладуване, алкохолна кетоза и др.
Биомаркери за оценка на заболяването
NAD, като биомаркер за оценка на заболяването, в момента е в етап на клиничен превод. През 2022 г. Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH Detection Kit на NADMED стана първият в света продукт за откриване на NAD, който получи CE-IVD сертификат (Директива за ин витро диагностични медицински устройства). Той открива концентрациите на NAD⁺ и NADH в цяла човешка кръв, с граници на откриване на NAD⁺: 330 nM; NADH: 119 nM. Концентрацията на NAD⁺ в цяла кръв на здрави възрастни е приблизително 18 μM (диапазон: 15–23 μM) [4], използвана за количествено откриване на цяла кръв и мониторинг на терапевтичните ефекти на прекурсора на NAD. Въпреки това, той все още не е одобрен като независим диагностичен критерий за заболяване.
В областта на научните изследвания потенциалната стойност на съотношението NAD/NADH в гръбначно-мозъчната течност или кръвта при невродегенеративни заболявания (напр. болест на Алцхаймер, болест на Паркинсон), туморен метаболизъм и оценка на стареенето се проучва задълбочено [5–8], но в момента се прилага главно в клинични изпитвания и научни изследвания, а не в рутинна клинична диагностика.
>Пазарен пейзаж на диагностичен-клас NAD<
Понастоящем глобалният диагностичен{0}}пазар на NAD е в етап на бързо развитие, движено от технологиите и растежа на търсенето. Индустрията бързо преминава от доминиран-внос към местно заместване. Диагностичното поле in vitro показва структурна диференциация: въпреки че общият брой комплекти реагенти е намалял, водещите предприятия (напр. Roche Diagnostics, Mindray Medical) остават стабилни и разширяват дейността си в нови проекти като метаболитни тестове и оценка на стареенето, докато малките и средни-предприятия намаляват производствените линии поради натиск върху печалбата.
Основните доставчици на NAD за-диагностика включват: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai и др.
Референции
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Коефициентите на екстинкция на редуцираната лента от пиридинови нуклеотиди [J]. J Biol Chem, 1948, 175 (1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Подобрен цикличен анализ за никотинамид аденин динуклеотид [J]. Anal Biochem, 1973, 53 (2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, et al. Метод на ензимен цикъл за никотинамид - аденин динуклеотид с ябълчена и алкохолна дехидрогеназа [J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] НАТАЛИЯ В. Балшова, Лев Г. Завилейски, Артем В. Артухов и др. Ефикасен анализ и значение на маркера на NAD⁺ в човешка кръв [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Нова система за откриване на биомаркери и нейното приложение в Китай [патент]. Китай, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, et al. Тип флуоресцентна сонда за откриване на пиримидинови нуклеозиди и нейния метод за получаване и приложение: Китай, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y и др. Хромогенно определяне на никотинамид аденин динуклеотид и неговите метаболити с използване на пиридинови нуклеозиди като кофактори и приложението му при диагностициране или лечение на ферментационни течности [J]. Китай, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ и др. Приложение на NAD⁺ като молекулярен маркер за персонализирано разработване на продукти за диагностициране на дискомфорт в женските полови органи [J]. Китай, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
